Аналіз сперми (TUNEL-метод) фрагментація ДНК

TUNEL-метод (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling) – це молекулярно-біологічне дослідження для виявлення розривів і пошкоджень ланцюжків ДНК. Навіть якщо в стандартній спермограмі дані в межах норми, дані фрагментації ДНК можуть пояснити, з якої причини не вдається зачати або виносити дитину, не виходить ЕКЗ тощо.

Здати аналіз на фрагментацію ДНК сперматозоїдів у Києві можна в лабораторії «Кью Лаб», розташованій у Голосіївському районі. Термін виконання – 30 робочих днів.

Навіщо потрібен аналіз на фрагментацію ДНК – і причому тут спермограма

Ці аналізи призначені для визначення різних показників.

Стандартна спермограма оцінює фертильність чоловіка шляхом вимірювання фізичних властивостей еякуляту (кислотності, об’єму), а також кількість, будову та рухливість сперматозоїдів. Але вона не перевіряє цілісність ДНК. Сперматозоїд з хорошими параметрами може нести пошкоджений генетичний матеріал, що нерідко пояснює випадки «незрозумілого» безпліддя.

Якщо ДНК сперматозоїдів пошкоджена, це може стати причиною завмерлого розвитку ембріона, невдалого запліднення, підвищеного ризику викидня і збільшує ризик вроджених вад у дитини.

Тест на фрагментацію ДНК сперматозоїдів показує розриви в одному або обох ланцюжках ДНК на рівні окремих клітин із дуже високою точністю.

Показання до здачі аналізу

Аналіз на фрагментацію ДНК сперми показаний у таких випадках:

• ідіопатичне безпліддя при нормальних результатах спермограми;
• неодноразові спроби ЕКЗ або ІКСІ (2 або більше разів) без результату;
• 2 і більше викиднів;
• варикоцеле (часто призводить до фрагментації);
• хронічні захворювання сечостатевої системи запального типу: простатит, орхіт;
• вік понад 40 років (у рамках планування вагітності);
• вплив токсичних факторів: куріння, алкоголь, професійні шкідливості;
• перед кріоконсервацією сперми;
• якщо в попередніх вагітностях були хромосомні аномалії у плода;
• підготовка до інших репродуктивних технологій (ВРТ) загалом.

Методи діагностики фрагментації ДНК – чим відрізняється TUNEL від інших

Для оцінки фрагментації ДНК сперматозоїдів методи застосовуються різні. Їхня мета однакова, але набір лабораторних методик суттєво відрізняється. До основних відносять:

• TUNEL-метод (tunel dna fragmentation) – виявляє реальні розриви, які є в молекулі ДНК. Це один із найточніших і найчутливіших прямих тестів. Його принцип полягає в такому: фермент приєднує до вільних кінців розірваних ланцюжків ДНК помічені нуклеотиди. Завдяки цьому пошкоджені клітини точно видні на спеціальному обладнанні.
• SCSA (аналіз структури хроматину сперматозоїдів) – вимірює стійкість хроматину до денатурації (розплітання), тобто наскільки ДНК у клітині може чинити опір руйнуванню під впливом тепла, кислот або ферментів. Сперматозоїди піддаються дії кислоти, яка «розплітає» пошкоджену ДНК, але залишає інтактну (здорову) недоторканою. Специфічний барвник яскраво підсвічує ці ділянки.
• SCD / HALO-тест (дисперсія хроматину) – візуально оцінює дисперсію (розсіювання) хроматину. Це простий і зручний метод. Білки, що оточують пошкоджену ДНК, видаляють хімічним шляхом. Якщо ДНК здорова, навколо ядра сперматозоїда утворюється ореол із петель ДНК. Пошкоджені клітини такого ореолу не утворюють.
• Comet-тест – дає можливість візуалізувати та виміряти ступінь пошкодження кожної клітини. Цей метод вважається найбільш чутливим до справжніх розривів. Метод полягає в такому: клітини поміщають в агарозний гель, руйнують мембрани і проводять електрофорез. Пошкоджені фрагменти ДНК зсуваються в електричному полі – візуально це нагадує комету з хвостом. Довжина та інтенсивність цього «хвоста» вказує на ступінь фрагментації.

Як підготуватися до аналізу на фрагментацію ДНК

Щоб отримати точний результат, важливо дотримуватися правил підготовки до тесту на фрагментацію ДНК і правильно зібрати біоматеріал.

Основні вимоги

• статеве утримання протягом 2 – 5 днів (оптимально 3 – 4 дні). Надто короткий або довгий період може знизити точність даних;
• за 3 – 5 днів не пити алкогольні напої;
• за 3 дні виключити гарячу ванну, сауну та лазню;
• напередодні тесту уникати стресу та інтенсивних фізичних навантажень;
• не приймати протигрибкові препарати та антибіотики (здавати сперму не раніше ніж через 14 днів після закінчення курсу лікування);
• перед збором матеріалу ретельно вимити статеві органи та руки.

Порядок збору біоматеріалу

Для проведення тесту використовується біоматеріал – еякулят, отриманий шляхом мастурбації.

• Біоматеріал потрібно зібрати в стерильний контейнер у спеціально обладнаній кімнаті лабораторії.
• Важливо отримати повну порцію еякуляту – це підвищує достовірність результату.
• Зразок одразу передається до лабораторії.

Які дослідження призначають разом із TUNEL-тестом

Аналіз фрагментації ДНК сперматозоїдів часто призначають з іншими дослідженнями в рамках комплексної діагностики. До таких аналізів відносять:

• спермограму розширену (морфологію за Крюгером) – базове дослідження перед TUNEL;
• MAR-тест (антиспермальні антитіла);
• каріотипування еякуляту (FISH-метод) – при підозрі на хромосомні аномалії;
• гормональний профіль чоловіка: тестостерон загальний, ФСГ, ЛГ, пролактин;
• УЗД органів мошонки та передміхурової залози;
• бактеріологічний посів сперми – при запальних захворюваннях.

Здати аналіз на фрагментацію ДНК у Києві – «Кью Лаб»

Лабораторія «Кью Лаб» – це сучасний центр, який забезпечує комфортні умови: спеціально обладнана приватна кімната для збору біоматеріалу, стерильні контейнери та дотримання всіх вимог до обробки зразка.

За тест на фрагментацію ДНК ціна вказана на сайті. «Кью Лаб» працює за прозорим прайсом без прихованих доплат.

Термін виконання цього аналізу – 30 робочих днів.

Де здати аналіз на фрагментацію ДНК сперматозоїдів у Києві?

Лабораторія «Кью Лаб» має три центри в місті:

• вул. Красилівська, 7 (головний офіс, Голосіївський район);
• пров. Обсерваторний, 3-А;
• просп. Лобановського, 17.

Ви можете обрати найбільш зручну для вас локацію.

Знижка 15% при першому зверненні в «Кью Лаб». Пенсіонерам та військовослужбовцям — постійна знижка 25% на всі види досліджень. Турбота про ваше здоров’я за спеціальною ціною.

Часті питання

Якщо спермограма в нормі — навіщо робити тест на фрагментацію ДНК?

Стандартна спермограма оцінює кількість, рухливість і форму сперматозоїдів, але не перевіряє цілісність їхнього генетичного матеріалу. Сперматозоїд із відмінними зовнішніми параметрами може нести пошкоджену ДНК — і саме це пояснює випадки «незрозумілого» безпліддя, коли обидва партнери формально здорові. TUNEL-тест виявляє ці приховані пошкодження на молекулярному рівні.

Який відсоток фрагментації ДНК вважається нормою?

До 15% — норма, фертильність не знижена. Від 15 до 25% — гранична зона, рекомендується консультація андролога. Вище 25% — підвищений рівень, пов’язаний зі зниженням імовірності зачаття та успішності ЕКЗ. Вище 50% — критично високий рівень, що потребує комплексного обстеження. Важливо: інтерпретацію проводить лікар з урахуванням усієї клінічної картини — один показник не є діагнозом.

Скільки днів утримуватися перед здачею аналізу на фрагментацію ДНК?

Оптимально — 3–4 дні статевої стриманості. Допустимий діапазон: 2–5 днів. Надто короткий період (менше 2 днів) знижує концентрацію сперматозоїдів, надто довгий (більше 5–7 днів) — збільшує частку постарілих клітин із пошкодженою ДНК. Саме тому дотримання цього діапазону є критичним для достовірності результату.

Чи можна повторно здати тест і отримати кращий результат?

Так. Рівень фрагментації ДНК — це не постійна величина. Нові сперматозоїди дозрівають кожні 74–90 днів, і при усуненні факторів ризику (куріння, алкоголь, перегрів, запалення, варикоцеле) показник може значно покращитися. Лікарі-андрологи нерідко призначають повторний тест через 3 місяці після корекції способу життя або лікування.

Чим TUNEL-тест відрізняється від звичайного аналізу сперми та каріотипування?

Спермограма оцінює параметри сперматозоїдів (кількість, рухливість, форму) — без даних про ДНК. Каріотипування виявляє хромосомні аномалії в клітинах. TUNEL-тест займає особливу нішу: він показує саме цілісність ДНК на рівні окремих сперматозоїдів — тобто наскільки генетичний матеріал придатний для передачі нащадкам. Ці три дослідження доповнюють одне одного і в складних випадках призначаються разом.

Коли після лікування варикоцеле можна здавати тест на фрагментацію ДНК?

Не раніше ніж через 3 місяці після хірургічного лікування варикоцеле. Саме стільки часу займає повний цикл дозрівання нових сперматозоїдів. Більш ранній аналіз відобразить якість клітин, сформованих ще до операції — результат буде недостовірним для оцінки ефекту лікування.